杆状病毒感染昆虫细胞的表达及纯化开题报告

 2023-01-05 13:19:25

1. 研究目的与意义

内容:1培养High Five昆虫细胞,用带有目的蛋白基因的重组杆状病毒感染细胞,收集细胞上清液,纯化除去杂质。

2使用Duo Flow蛋白纯化系统对表达的样品进行纯化,运用SDS-PAGE、Western Blot对培养液中的目的蛋白及纯化后蛋白进行检测。

意义:昆虫杆状病毒表达系统是当今基因工程四大表达系统之一,在研究基因表达调控、蛋白质结构和功能分析及各种生物活性物质的制备等方面发挥着日益重要的作用。

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2. 文献综述

文献综述杆状病毒侵染昆虫细胞的表达及纯化张新生1,2(1.南京中医药大学翰林学院,江苏 泰州 225300;2.上海新生源医药集团有限公司,上海201210)摘要:杆状病毒(Baculovirus)是闭合双链环状DNA病毒,病毒呈杆状因此命名为杆状病毒。

是已知昆虫病毒中最大的类群,是发现最早研究最多且实用意义很大的昆虫病毒。

该系统具有许多优点,如多角体启动子控制下的高表达,完善的转译后加工修饰,较易从无血清培养上清中纯化蛋白,无内毒素污染。

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3. 设计方案和技术路线

1. High Five细胞培养。

2. 重组病毒的扩增。

3. 重组病毒感染昆虫High Five细胞表达外源蛋白。

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4. 工作计划

第一阶段(2022.12~2022.01) 搜集学习资料,选题第二阶段(2022.02) 确定课题,查找学习相关文献资料第三阶段(2022.03~2022.04) 完成开题报告,依照杆状病毒感染昆虫细胞的步骤和要求开展相关实验和检验工作第四阶段(2022.05) 完成毕业设计(论文)

5. 难点与创新点

1.实验性方法的研究2.研究完成杆状病毒感染昆虫细胞表达目的蛋白的步骤、检测、纯化。

3.所研究内容促进杆状病毒昆虫细胞表达系统的进步。

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