1. 研究目的与意义
毕业设计的内容：1、 转录因子WRKY44过表达和RNAi载体构建2、 转录因子WRKY44基因全长的克隆3、 转录因子WRKY44转基因丹参植株的获得4、 丹参转录因子WRKY44的功能确定，测定转基因丹参中酚酸类物质的含量变化，并分析丹酚酸生物合成过程中的关键酶基因在转基因丹参植株中的表达变化情况，明确转录因子WRKY44 在丹酚酸生物合成过程中的作用。
毕业设计的意义：丹参是传统的大宗中药材，其水溶性活性成分丹酚酸具有活血化瘀、通经活络之功效。
以丹酚酸为主要成分的丹参多酚酸盐制剂对治疗心脑血管疾病有较好的疗效，其市场销售额达几十亿元。
2. 文献综述
丹参化学成分及丹酚酸生物合成研究进展040015117 向亚萍 15资源摘 要：丹参作为传统大宗中药，在治疗心血管疾病方面有显著疗效。
目前，由于丹参的药材品质有所下降，导致市场上出现丹参供不应求的现象，所以从转录因子方面来调控活性成分丹酚酸和丹参酮的生物合成有重要意义。
关键词：丹参；转录因子；丹酚酸；丹参酮Research progress in chemical components in Salvia Miltiorrhiza and biosynthesis of Salvianolic acidAbstract: Salvia Miltiorrhiza Bunge has remarkable effect in cardiovascular disease as traditional Chinese herb. At present, because of its declining quality, the shortage of Salvia Miltiorrhiza plants cannot meet the increasing demand. As a consequence, more researches on transcription factors would play important role in regulating biosynthesis of Salvianolic acid and Tanshinone.Key words: Salvia Miltiorrhiza; transcription factors; Salvianolic acid; Tanshinone1.1 丹参简介丹参Salvia Miltiorrhiza Bunge为唇形科鼠尾草属多年草本植物，其药用部位为干燥的根及根茎。
3. 设计方案和技术路线
研究方案：1、 构建丹参转录因子WRKY44的转基因植株体系：构建转录因子过表达载体以及RNAi干扰载体；把构建好的载体转入根瘤农杆菌菌株中，然后侵染丹参的外植体以产生过表达或RNAi转基因植株。
2、 利用qRT-PCR技术检测丹酚酸合成途径中的关键基因在WRKY44转基因植株和非转基因植株中的表达情况。
3、 利用代谢组学手段测定转基因植株中丹酚酸含量，检测是否会促进丹酚酸生物合成。
4. 工作计划
课题组已经构建了无菌丹参材料。
5. 难点与创新点
本实验设计根据以往实验发现该转录因子的表达与丹酚酸积累量有显著关系，因此构建该转基因体系并分析其功能具有重要意义。
该实验设计利用基因技术以及分子生物学技术，具有一定的特色与创新意义。
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