迷迭香酸对高温诱导的成肌细胞凋亡的作用开题报告

 2023-02-12 04:34:45

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

一、研究意义

迷迭香酸(RA)是一种含多酚羟基的酸,分子式为C18H16O8化学名称为R(t)2-[[3-(3,4-二羟基苯基)-1-氧代-2-丙烯基]氧基]-3,4-二羟基苯丙酸,。有报道显示RA在多种细胞类群RA存在不同的生物活性,如抗氧化剂,抗炎,抗过敏,抗癌,抗微生物剂和神经保护活性。然而,RA对热应激引发的损伤的作用是未知的。我们推测RA对高温诱导成肌细胞的凋亡具有一定的作用。本实验主要意义在于:揭示迷迭香酸对高温诱导成肌细胞凋亡的作用。

二、国内外研究概况

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2. 研究的基本内容和问题

一、研究目标

培养小鼠C2C12细胞,将其分为对照组和处理组,通过相关指标来探究RA对高温诱导C2C12细胞损伤的作用。

二、研究内容

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3. 研究的方法与方案

一、研究方法

本实验利用小鼠的C2C12细胞作为试验对象,设置处理组和对照组来进行比较,在高温处理组中加入RA,使用MTT法检测细胞存活率,Hoechst33342/PI双染色法检测细胞凋亡,测定caspase-3的含量,细胞内活性氧(ROS)的含量以及MDA的形成和SOD活性的测定。最后进行定量实时PCR(RT-PCR)检测相关mRNA(caspase-3,HSP72,Bax/Bcl-2)的表达水平。

二、技术路线

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4. 研究创新点

特色或创新之处

有报道显示RA在多种细胞类群RA存在不同的生物活性,如抗氧化剂,抗炎,抗过敏,抗癌,抗微生物剂和神经保护活性。然而,RA对热应激引发的损伤的作用是未知的。我们推测RA对高温诱导成肌细胞的凋亡具有一定的作用。目前国内已有针对C2C12细胞的研究,其中氧化反应对C2C12细胞的影响本次探究较为接近,因为热应激也属于氧化反应的一种,但是目前并没有关于RA对高温诱导C2C12细胞凋亡的作用的研究。本实验主要创新在于:揭示迷迭香酸对高温诱导成肌细胞凋亡的作用。

5. 研究计划与进展

(1)2013年12月-2014年1月准备实验相关材料,练习实验基本操作,培养C2C12细胞,测MTT,Hoechst33342/PI双染色法检测细胞凋亡,测定caspase-3的含量

(2)2014年3月-2014年4月细胞内活性氧(ROS)的含量以及MDA的形成和SOD活性的测定,设计相关引物,并作RT-PCR定量分析;

(3)2014年5月整理数据,撰写文章

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