1. 研究目的与意义
内容：本课题将围绕角膜基质脱细胞的方法，例如：络合剂加盐-阴离子表面活性剂法、胰酶联合EDTA交联液法等方法进行延伸研究，从而发现一些能够快速且温和地去除角膜上皮层和免疫原细胞成分的方法。
通过比较角膜基质胶原结构的破坏程度，胶原纤维排列是否整齐，孔隙均匀规则，有无细胞残留，板层结构保留完整程度，来验证有无得到完好的脱细胞角膜基质。
具体研究内容：1. 查找文献、专利，熟悉角膜基质脱细胞的各类方法，进行实验研究通过比较方法，来设计试验确定一种可行的方法；2. 设计试验脱细胞角膜组织的最佳获取方法，筛选出有价值的实验参数；3. 比较实验后角膜组织的理化性能和机械性能等，在角膜基质不变性的前提下获得脱细胞角膜组织，确定脱细胞角膜基质的完整性；4. 提供一种去除角膜中免疫原细胞成分和可溶性蛋白的同时能够完整保留角膜基质胶原结构的角膜脱细胞方法。
2. 文献综述
角膜基质脱细胞处理的研究刘耀文 120204121【摘要】：本课题将围绕角膜基质脱细胞的方法，例如：络合剂加盐-阴离子表面活性剂法、胰酶联合EDTA交联液法等方法进行延伸研究，从而发现一些能够快速且温和地去除角膜上皮层和免疫原细胞成分的方法。
通过比较角膜基质胶原结构的破坏程度，胶原纤维排列是否整齐，孔隙均匀规则，有无细胞残留，板层结构保留完整程度，来验证有无得到完好的脱细胞角膜基质。
【关键词】：角膜；角膜基质；脱细胞1.脱细胞角膜基质脱细胞角膜基质是近年来组织工程角膜的研究热点，其保持了天然角膜的结构和力学性能，并且含有人工合成的支架所不具有的生长因子，为细胞生长提供了良好的生长环境，并且去除了组织中能引起免疫排斥反应的细胞成分（范先群，2008）。
3. 设计方案和技术路线
为了实现上述目的，提供一种角膜的脱细胞方法，包括以下步骤:A、将摘取的动物角膜置于水中,振荡处理，以使上皮层脱落;B、将所述角膜置于脱细胞试剂中，振荡处理;C、将所述角膜置于水中，振荡处理;D、交替重复步骤B和步骤C，以使基质细胞和内皮细胞脱落;其中，所述脱细胞试剂含有NaCl和EDTA。
在实验中，通过使用苏木精-伊红染色对脱细胞角膜基质进行的脱细胞处理前和脱细胞处理后的染色，通过观察细胞质和细胞外基质中的着色成分来确定角膜基质的实验状况。
4. 工作计划
2022.01-2022.02 熟悉角膜基质脱细胞的理化性质及基本实验路线；2022.02-2022.03 查阅文献，制定实验方案，完成文献综述、开题报告；2022.03-2022.05 通过设计实验，去除角膜中免疫原细胞成分和可溶性蛋白，比较实验后角膜组织的理化性能和机械性能等，完成数据分析及实验论文；2022.05-2022.06整理分析实验数据，撰写毕业论文。
5. 难点与创新点
1.本实验采用物理脱细胞方法，通过脱细胞试剂和水的交替使用，反复改变组织渗透压，能够有效的去除容易引起免疫反应的角膜细胞成分和可溶性蛋白，同时，本实验所使用的试剂温和，能够完整的保留角膜基质胶原结构。
2.本文利用的方法制备出脱细胞猪角膜基质，有望用作捐献角膜的等效替代物用于角膜基质病盲患者的临床角膜移植和治疗，为众多角膜基质病盲患者重见光明创造了条件。
3.在实验中可以进一步的优化，通过更改实验环境或者使用相似的实验材料替代物来获得更好的实验结果。
以上是毕业论文开题报告，课题毕业论文、任务书、外文翻译、程序设计、图纸设计等资料可联系客服协助查找。
