天冬总皂苷抗OVA致敏小鼠作用机制研究开题报告

 2023-01-03 07:22:44

1. 研究目的与意义

天冬保定肺气、主肺气咳逆,喘息促急之效备受医家重视,近年来以天冬作为原材料制成药的需求量呈快速增长态势,因此对天冬成分和药用价值的研究也成为中药领域研究的热点。

现代多项研究显示,天冬有抗炎、镇咳、祛痰、平喘及调节免疫作用。

但天冬治疗咳喘作用方式及机制尚不明确,因此本研究考察了天冬的化学物质基础。

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2. 文献综述

中药天冬的研究进展高姗姗摘 要:目的:探究天冬的产地加工、炮制工艺、化学成分及药理作用研究概况,以便了解天冬,找出天冬研究缺失部分,以开展研究工作。

方法:通过查阅大量专著及文献,概括天冬研究的上述四个方面。

结果:对文献中天冬相关内容进行全面而系统的整理,发现天冬的产地加工报道较少,加工炮制过程存在问题,没有特征性的化学成分,药理作用有待进一步研究。

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3. 设计方案和技术路线

研究方案:1.查阅文献了解天冬的历史沿革、炮制方法、化学成分及提取方法、药理作用及临床应用。

2.实验内容(1)实验准备:雌性BALB/c小鼠,雌性,6~8周龄;饲料和垫料;天冬500g;地塞米松磷酸钠注射液;卵蛋白V级;氢氧化铝凝胶;ELISA试剂盒(IL-4和IFN-γ,IgE);快速瑞姬氏染液、血中嗜酸性细胞直接计数液;石油醚;甲醇;其他实验装置、设备。

(2)天冬炮制品的制备:除去杂质,迅速洗净,切薄片,干燥; 天冬总皂苷的提取:称取天冬粗粉80g,置索氏提取器内,用石油醚脱脂2h,残渣挥去溶剂后,甲醇800ml 80℃回流提取至无色,将提取液挥干,加蒸馏水300ml溶解,用水饱和正丁醇150ml萃取4次,合并正丁醇部分,用正丁醇饱和的水洗涤,减压回收至干,残渣用蒸馏水溶解制得皂苷提取液250ml,低温保存。

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4. 工作计划

3.33.10根据已知文献准备实验动物、试剂与试药、实验器材;3.133.19饲养动物调节其适应性;3.20-4.17每日称重 灌胃给药(天冬皂苷提取液),其中3.20和4.3造模,4.11-4.17每日给药激发 阳性药腹腔注射4.18-4.22气道高反应测定、血中Eos计数、血清中IgE测定BALF细胞分类计数、肺组织匀浆中IL-4和IFN-γ的测定、肺组织HE染色4.23-5.10 实验结果整理、分析及撰写论文

5. 难点与创新点

本研究旨在探索天冬中总皂苷对治疗哮喘的影响及其作用机制,且使用的是较有优势的OVA致敏模型。

在动物选用上使用对致敏原较为敏感的雌性小鼠,能对造模成功的几率有很大提升。

本研究就血液、肺部等多项指标共同评测,实验评测指标均与作用机制紧密相关。

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