1. 研究目的与意义
1）内容：查阅文献资料，深入了解人参的免疫功能、五灵脂对人参免疫功能的影响、斑马鱼的免疫，从而寻找合适的观测指标，以斑马鱼为实验模型确立实验方案，研究人参对于斑马鱼免疫功能的影响以及人参五灵脂配伍后对与斑马鱼免疫功能的影响从而推断五灵脂对人参免疫功能的影响。
我们主要以免疫细胞：中性粒细胞、巨噬细胞为观测指标，免疫因子：TNF- α、IL-1为观测指标。
分析处理实验数据，得出结论并撰写论文。
2. 文献综述
五灵脂对人参的免疫功能的影响周祎靖 14中药2 南京中医药大学 041214218摘要:传统中医认为人参具有大补元气,复脉固脱,生津止血等作用,作为补益药,从中提取出的人参皂苷可以提高人体免疫力;而十九畏认为人参与五灵脂相畏会影响人参的疗效。
该文讨论了人参皂苷对于免疫系统作用的成分与过程机理,以及五灵脂对于人参皂苷免疫作用的影响。
在此基础上,我们对人参的免疫作用的研究前景进行了展望。
3. 设计方案和技术路线
1） 研究方案：第一阶段：查阅文献，主要是关于人参对免疫系统的作用；第二阶段：整理资料，对实验内容有一定认识，有初步设想；第三阶段：完善实验方案以斑马鱼幼鱼为实验模型，通过LPS 以及氢化可的松浸泡建立免疫抑制的斑马鱼模型，并用人参、五灵脂水煎液孵育。
通过中性红染色巨噬细胞、苏丹黑B染色中性粒细胞，通过显微镜观测细胞情况（中性粒细胞、巨噬细胞）,测试免疫因子（TNF- α、IL-1）；第四阶段：进行实验：先进行预实验造模浓度的探索，再进行正式实验；第五阶段：分析处理实验结果，撰写论文。
技术路线：首先，掌握斑马鱼的基本养殖方法：十四小时光照、十小时黑暗，孵育鲜虾、早晚各一次喂食，清理粪便，在循环系统中进行养殖。
4. 工作计划
现阶段，我们已经查阅并整理文献，深刻认识了人参对于免疫系统的影响，以及人参五灵脂配伍后可能对机体产生的影响，学习并掌握了斑马鱼养殖的基本操作，并且建立实验方案，准备以细胞染色技术来观测人参、五灵脂对于斑马鱼免疫细胞的影响。
目前已经进行了免疫抑制剂剂量确定的预实验，中性红染色的预实验，苏丹黑染色的预实验，实验的操作和剂量已经基本确定。
5. 难点与创新点
1）本课题立意较新，将从固有免疫的角度探寻十九畏中人参畏五灵脂的现代作用机制；2）相对于已有研究来说，所选模型动物为斑马鱼，属于方法创新；指标较为系统、新颖，可避免离体实验的局限性，也可反应大体观察难以发现的生理病理变化过程。
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