1. 研究目的与意义
内容:通过固相合成法合成功能性多肽序列AAGFLGR8,再与近红外染料P18共价连接得双亲性多肽复合物,在多肽序列中再引入一个赖氨酸以提高该多肽载药量。
通过HPLC进行纯化,纯化产物经质谱验证。
利用包括透射电镜(TEM)、圆二色谱(CDS)、紫外分光光度计(UV-Vis)、荧光(FL)等进行表征。
2. 文献综述
基于P18双亲性多肽分子的SDT抗肿瘤摘要: 光动力疗法应用于人类肿瘤研究已有 30 年历史,随着一些光敏剂具有的声敏性被发现,声动力疗法便受到相关领域学者的关注。
通过在声光领域对光动力疗法和声动力疗法杀伤肿瘤细胞机制的研究,发现两者可通过各自独特方式产生相似的活性氧类物质,继而启动相关凋亡通路来杀伤肿瘤细胞;另一方面组织蛋白酶 B广泛存在于哺乳动物的各种器官中,不仅参与细胞凋亡和自噬的全过程,而且与肿瘤的侵袭和扩散密切相关。
它通过水解黏连在细胞间的蛋白质,加速癌细胞的转移和肿瘤内血管的生成。
3. 设计方案和技术路线
研究方案:主要包括两个方面,构建基于P18双亲性多肽分子和细胞实验。
首先合成多肽序列AAGFLGR8,再将P18接到多肽上,包括单分子P18多肽结合物和双分子P18多肽结合物,接着对所得的产物利用HPLC进行纯化,并对纯化产物用质谱进行鉴定,然后对纯化产物进行一系列表征利用TEM观察形貌、CDS观察二级结构、UV-Vis及FL观察酶切前后药物释放;另外通过一系列细胞实验,细胞吞噬实验、细胞毒性实验及声动力治疗实验对疗效进行评价。
技术路线:l两大部分:构建双亲性多肽结合物和疗效评价。
4. 工作计划
已完成前期文献阅读与总结、紫红素(P18)纳米探针( Purpurin18-AAGFLGR8)的合成与纯化、产物鉴定、HPLC条件等。
5. 难点与创新点
本课题拟通过合理设计两亲性多肽与P18的结合物,联合P18和两亲性多肽的特性,构建出的两亲性多肽产物用于近红外和光声成像以指导声动力抗肿瘤治疗。
该两亲性多肽具有生物可降解性、稳定性、高效能、同时进行近红外和光声成像、并可用于酶活性检测及通过声动力治疗肿瘤等优势,具有一定的先进性和创新性。
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