1. 研究目的与意义
内容:1运用制备液相(RP-HPLC)对莲子心中酚性生物碱进行分离。
2对分离所得的物质进行分析鉴定。
意义:莲子心为睡莲科植物的成熟种子中的干燥幼叶及胚根。
2. 文献综述
文献综述朱秋洁莲子心(Nelumbinis plumula)为睡莲科植物(Nelumbo nucifera Gaertn)的成熟种子中的干燥幼叶及胚根。
主要产自湖南、湖北、福建、江苏、浙江等地,具有清心安神、交通心肾、涩精止血的功效,用于神昏谵语、心肾不交、失眠遗精、血热吐血的治疗。
被2010年版《中国药典》收载[1]。
3. 设计方案和技术路线
研究方案:运用制备液相(RP-HPLC)分离纯化莲子心微量生物碱样品:莲子心酚性生物碱 实验条件:柱子:MoDcolspring C18(25mm x 250mm,10 μm)流速:15 mL/min样品浓度:75 mg/mL进样量:1.5 mL 检测波长:282 nm流动相:水-三乙胺(pH9.0);甲醇-三乙胺梯度洗脱条件:Time(min) A%:水-三乙胺(pH9.0) B%:甲醇-三乙胺060 4010 60 40 40 40 6065 20 8075 60 4085 60 40按照图谱分段收集各个组分,减压浓缩后通过高效液相色谱分析,摸索条件后进行进一步分离得到生物碱单体。
实验条件:柱子:LlchrospherC18 (10 mm250 mm,5μm )流动相:水-甲醇进样量:200 μl流速2 ml/min得到单体后通过高效液相进行定量分析,再运用薄层色谱与已知莲子心中的生物碱进行比对,最后通过核磁共振鉴定。
技术路线:
4. 工作计划
2022.1.4-2022.1.19分离2g样品,分段收集各个组分并减压浓缩2022.2.12-2022.3.3分离5g样品,分段收集各个组分并减压浓缩2022.3.6-2022.4.20高效液相检测所收集的样品各组分2022.4.21-2022-5.15 完成毕业论文
5. 难点与创新点
莲子心生物碱类化合物大部分在氯仿,乙醚,乙醇,甲醇等有机溶剂中溶解性良好,因此莲子心中的生物碱类物质分离纯化的方法较多,包括大孔树脂吸附法,膜分离法,色谱法等。
而本实验开始采用制备型高效液相,不仅纯度能达到90%,且所用的流动相仅为甲醇与水,极大降低了毒性,更重要的是大大提高了效率,真正实现了只要在高效液相色谱上出现峰的物质就能在制备型高效液相上实现很好的分离。
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