1. 研究目的与意义
1. 毕业设计的内容：研究075对影响结直肠癌细胞的增殖以及凋亡药理学活性，探究其是否通过抑制NF-KB信号通路发挥其功效。
2.毕业设计的意义：结直肠癌是常见的消化系统恶性肿瘤之一，占胃肠道肿瘤的第二位。
好发部位为直肠及直肠与乙状结肠交界处, 其早期无明显症状, 当肿块达1~2CM时, 随着肿瘤的增大, 患者可出现食欲不振、体重减轻、贫等全身症状外, 尚有排便次数增多, 排便不尽、便意频繁、里急后重等癌肿局部刺激症状，还可以向远处转移到肝脏, 引起肝肿大, 腹水、黄疸, 甚至恶液质等表现，严重危及患者的生命安全。
2. 文献综述
综述： BRD4及其抑制剂的研究进展 学生：于越指导老师：孙东东（南京中医药大学）摘 要： 近年来，溴结构域及超末端结构( BET) 亚家族成员是一类研究较多的靶点。
有研究显示，BRD4（溴结构域蛋白 4）达失调与血癌、乳腺癌以及结肠癌等多种癌症疾病的形成有关，通过靶向抑制BRD4，可以诱发肿瘤细胞凋亡即增殖减缓，从而达到抗肿瘤作用。
因此，BRD4作为一种极具潜力的抗肿瘤靶点，在近些年得到了广泛的关注和开发。
3. 设计方案和技术路线
1.研究方案（1）初步筛选：选取HCT-116、CaCo-2、LoVo、HT-29等直结肠癌肿瘤细胞株，采用MTT法测定075在给药24h以及48h对于四种不同的肿瘤细胞的生长抑制作用，并且之后计算出不同浓度下的抑制率以及半数抑制浓度IC50，并且确定其给药剂量。
最后筛选出其中对于075有较高敏感度的肿瘤细胞株，进一步对研究。
（2）075对细胞增殖的影响：通过显微镜进行观察，在不同给药浓度下，细胞的增殖情况。
4. 工作计划
1.1月4日到2月20日实验室学习Western-Blot完整操作，蛋白的培养及提取，MTT,流式等操作，了解相关原理2. 2月28日确定课题3.2月29日到3月6日查询资料，为开题报告及综述的撰写整理资料4.3月6日到3月10日复苏所需细胞，进行培养以及加药5.3月11日到4月20日，进行实验，例如MTT，细胞形态观察，流式，western blot，细胞荧光染色6.4月21日到5月10日整理数据，确保数据的足量以及准确性7.5月10日到6月1日撰写论文，准备答辩
5. 难点与创新点
目前，已有很多关于BRD4抑制剂的种类，学者们也不断研究，本课题所涉及的药物075作为一种新药，目前还未有相关实验文献，故此次毕业设计我选取了该种药物，来研究其对直结肠癌细胞的抑制增殖以及诱导凋亡作用，并探讨其作用机制。
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