1. 研究目的与意义
镰形棘豆 (Oxytropis.falcata Bunge)是棘豆属野生药用植物,主要分布于青藏高原地区，资源丰富。其药用部位为全草,藏药名为达夏,是藏药三消炎药之一。其根、茎或全草入药,味辛、性寒，有小毒，入肺、脾，具有清热解毒、涩脉止血、生肌愈疮和通便等功效。内服可治流感、扁桃体炎、高烧和喉炎等症以及藏医的黄水病,外敷治疗疮疖肿痛、创伤、骨伤疼痛。民间多用于解毒、镇痛,当地居民有用其粉末撒于患处治疗刀伤,效果甚好。《晶珠本草》称其为草药之王。
藏药镰形棘豆具有良好的镇痛、抗炎、抗肿瘤、抗氧化等作用，其主要的活性成分为黄酮类化合物，因其结构多样，功效迥异，通过对其提取分离，找寻镰形棘豆中的黄酮类化合物单体，并对其进行定性和定量分析。为之后的药理和毒理研究打好基础。
本实验主要是对镰形棘豆中黄酮类化合物进行系统的研究，首先是对黄酮类化合物的提取，利用石油醚和乙酸乙酯萃取黄酮；其次，利用硅胶柱色谱和聚酰胺柱色谱，对提取出的各部位进行分离；最后，将分离出的黄酮类化合物经过HPLC色谱分析，通过和文献比对，得出其结构类型和结构的信息。
2. 文献综述
镰形棘豆中黄酮类化合物化学成分研究综述
李天昊
(南京中医药大学,南京210023)
摘要：藏药镰形棘豆在民族医药中有广泛的应用。该植物的化学成分主要包括黄酮、三萜皂苷、生物碱等,主要具有镇痛、抗炎、抗肿瘤、抗氧化等药理作用。本文综述了近20年来对镰形棘豆的化学成分及提取分离等方面的研究进展,为藏药镰形棘豆的开发利用提供参考。
关键词：镰形棘豆；黄酮类；化学成分；提取分离
Abstract: Oxytropis falcata Bungeis widely used in national medicine. The chemical composition of the plant mainly includes flavonoids, triterpene saponins and alkaloids. With pharmacological effects such as analgesic, anti-inflammatory, anti-tumor and anti-oxidation. This article reviews the research progress of chemical constituents, extraction and separation ofO. falcatain the past 20 years, to provide reference for the future development and utilization of O. falcata.
Key words: Oxytropis falcata Bunge; flavonoids; chemical constituents; extraction and separation.
镰形棘豆 (Oxytropis falcata Bunge)是棘豆属野生药用植物，主要分布于青藏高原地区，资源丰富。其药用部位为全草，藏药名为达夏[1]，是藏药三消炎药之一。其根、茎或全草入药，味辛、性寒，有小毒，入肺、脾，具有清热解毒、涩脉止血、生肌愈疮和通便等功效。内服可治流感、扁桃体炎、高烧和喉炎等症以及藏医的黄水病，外敷治疗疮疖肿痛、创伤、骨伤疼痛[2]。民间多用于解毒、镇痛，当地居民有用其粉末撒于患处治疗刀伤，效果甚好。《晶珠本草》称其为草药之王[3]。近年来，张晓晶[4-5]、确生[6]等人对该药化学成分进行系统的研究，分离出了多种成分，其中以黄酮类化合物和生物碱类化合物为主，药理研究表明其具有镇痛、抗炎、抗氧化[7]、抗肿瘤[8]等活性。
一、镰形棘豆植物学综述
多年生草本，高1-35厘米，具粘性和特异气味。根径6毫米，直根深，暗红色。茎缩短，木质而多分枝，丛生。羽状复叶长5-12 (-20) 厘米；托叶膜质，长卵形，于2/3处与叶柄贴生，彼此合生，上部分离，分离部分披针形，先端尖，密被长柔毛和腺点；叶柄与叶轴上面有细沟，密被白色长柔毛；小叶25-45，对生或互生，线状披针形、线形，长5-15 (-20)毫米，宽1-3 (-4)毫米，先端钝尖，基部圆形，上面疏被白色长柔毛，下面密被淡褐色腺点。6-10花组成头形总状花序；花葶与叶近等长，或较叶短，直立，疏被白色长柔毛，稀有腺点；苞片草质，长圆状披针形，长8-12毫米，宽约4毫米，先端渐尖，基部圆形，密被褐色腺点和白色、黑色长柔毛，边缘具纤毛；花长20-25毫米；花萼筒状，长11-16 (-18)毫米，宽约3毫米，密被白色长柔毛和黑色柔毛，密生腺点，萼齿披针形、长圆状披针形，长3-4.5毫米；花冠蓝紫色或紫红色，旗瓣长18-25毫米，瓣片倒卵形，长15毫米，宽8-11毫米，先端圆，瓣柄长10毫米，翼瓣长15-22毫米，瓣片斜倒卵状长圆形，先端斜微凹2裂，背部圆形，龙骨瓣长16-18毫米，喙长2-2.5毫米；子房披针形，被贴伏白色短柔毛，具短柄，含胚珠38-46。荚果革质，宽线形，微蓝紫色，稍膨胀，略成镰刀状弯曲，长25-40毫米，宽6-8毫米，喙长4-6毫米，被腺点和短柔毛，隔膜宽2毫米，不完全2室；果梗短。种子多数，肾形，长2.5毫米，棕色。花期5-8月，果期7-9月。
图1 镰形棘豆植物图
二、镰形棘豆黄酮类成分化学研究概况
迄今为止，从棘豆属20余种植物中分离得到120多个化学成分，主要包括黄酮类、皂苷类及生物碱类，以及少量木脂素[10]、脂肪酸、挥发性成分[11]和氨基酸[12]等。
现代研究表明：黄酮类成分为镰形棘豆的主要化学成分，在该植物中含量较高。迄今为止，已从该植物中分离得到黄酮苷、黄酮及二氢黄酮、二氢查耳酮、黄酮醇、查耳酮、异黄烷及黄烷酮[13]，见表1。该植物中的黄酮类成分主要以黄酮苷的形式存在，且均为氧苷，苷元主要为芹菜素、白杨素、木犀草素、山柰酚、槲皮素、鼠李素、异鼠李素、鼠李柠檬素、甲基鼠李素等，糖取代基有D-葡萄糖、L-鼠李糖、L-阿拉伯糖、D-木糖等[14]。
三、镰形棘豆黄酮类成分提取分离工艺概述
3.1提取
取镰形棘豆药材，用体积分数的95％乙醇于室温下冷浸提取3次，每次3d，减压抽滤，药渣再用体积分数50%的乙醇于室温下冷浸提取3次，每次，3 d，减压抽滤，将所得提取液于50℃下减压浓缩成浸膏后，加人适量蒸馏水搅拌悬浮，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙醋、正丁醇萃取，得石油醚萃取物，氯仿萃取物，乙酸乙醋萃取物，正丁醇萃取物。以上为杨欢[15]提取步骤，在此基础上，根据黄酮类化合物的理化性质，因其具有酚羟基而具有酸性，为了进一步纯化黄酮类化合物，在得浸膏之后可采用碱提酸沉法，去除杂质，纯化黄酮。曾棋平[16]实验结果表明，最佳提取工艺为加入20倍量66%乙醇回流提取2次，每次84 min，在此条件下，总黄酮的含量达23.21 mg.g-1。
3.2分离
分离主要是利用常压硅胶柱色谱进行分离，因黄酮具有酸性，本来最适合的分离方法是利用聚酰胺吸附色谱法，但实际操作和环境等诸多条件，经过查阅大量文献[17]，均是利用常压硅胶柱色谱进行分离，其效果甚好。
具体工艺为，取石油醚部分浸膏20g用少量溶剂溶解，拌入20 g硅胶，挥干溶剂，湿法装柱（硅胶300 g，200-300目），用石油醚-氯仿提取洗脱，每份收集100 ml，薄层检测，合并相同流分。[18]
四、药理作用
4.1镇痛
热刺激模型（热板法）和化学刺激模型 （醋酸扭体法和福尔马林法）在本研究中被用于确定镰形棘豆镇痛作用的类型。在热板法中，镰形棘豆的抑制作用不明显，没有对小鼠舔足或跳离的时间产生影响。然而，镰形棘豆对化学刺激引起的疼痛效果明显，具有外周镇痛作用。[19]
4.2抗炎
Chen ZP[20]通过小鼠耳肿胀模型、大鼠佐剂关节炎模型、热板法和醋酸扭体法发现，高剂量（3.120 g/kg）的镰形棘豆总黄酮与挥发油组合物经皮给药具有良好的抗炎镇痛活性。杨丽霞[21]实验结果表明，镰形棘豆总黄酮在一定程度上可减少胰岛素抵抗细胞模型炎症因子的释放，具有改善胰岛素抵抗的作用。Yang GM等[22]推测，镰形棘豆总黄酮部位的抗炎机制可能与抑制炎症介质前列腺素E2的水平，降低机体脂质过氧化的程度，以及提高机体抗氧化酶的活性有关。
4.3抗肿瘤
黄酮类化合物具有不同程度的抑制人癌细胞株SMMC27721、Hela、A549、MGC2803、MDA2MB2231、LOVO细胞生长的作用，并具有一定的剂量依赖性。镰形棘豆含有2，4-二羟基查尔酮、芹菜素、异甘草素、2-羟基-4-甲氧基查尔酮等黄酮类成分，在体外抗肿瘤实验中显示出抗肿瘤活性。[23]李萌[24]研究表明AcF主要含黄酮类成分，含量为18.9%；AlF主要为生物碱成分，含量为64.1%。AcF高剂量组降低雌性、雄性小鼠瘤体质量的作用明显，与模型组比较，差异有统计学意义（P，P），抑瘤率分别为36.3%, 32.8%；AlF高剂量组降低雌性小鼠瘤体质量的作用明显，与模型组比较，差异有统计学意义（P），抑瘤率为29.7%。与模型组比较，CTX组小鼠的脾脏、胸腺指数均明显降低，差异有统计学意义（P，P）；而AcF、AlF各剂量组与模型组比较，脾脏、胸腺指数差异均无统计学意义（P>0.05）。肿瘤组织病理形态学观察显示AcF、AlF各给药组肿瘤细胞出现不同程度的坏死。结论镰形棘豆醇提物AlF、AcF均对Lewis肺癌荷瘤小鼠具有明显的抗肿瘤作用，黄酮类成分的作用比生物碱略强，其抗肿瘤机制还有待进一步研究。
4.4抗氧化
Wang D等[25]通过实验发现，镰形棘豆总黄酮成分中的5，7-二羟基-4′-甲氧基黄酮醇具有很强的体外清除自由基活性。李茂星等[26]采用亚铁离子催化过氧化氢（H2O2）产生羟自由基（OH）的方法以及清除1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基法，发现镰形棘豆总黄酮具有良好的体外抗氧化能力，且活性与剂量呈正相关。
4.5防紫外
李茂星[27]实验运用大鼠急性紫外线损伤模型评价镰形棘豆总黄酮霜的保护作用。实验结果表明：从外观上看，1%镰形棘豆总黄酮霜能明显防止紫外线急性损伤引起的大鼠皮肤红肿、脱皮及溃烂的发生。病理切片表明1%镰形棘豆总黄酮霜组大鼠皮肤仅见轻微的表皮和角质层增厚，未出现角化过度，角质层血浆渗出，棘层肥厚，及局部微脓肿、水肿、中心粒细胞浸润、红细胞渗出等急性紫外线损伤变化。
4.6止咳祛痰
姜华等[28]通过小鼠氨水引咳及气管酚红排泌实验发现，与正常对照组比较，镰形棘豆氯仿、乙酸乙酯、正丁醇以及挥发油4个部位均能显著延长小鼠咳嗽潜伏期和减少咳嗽次数（P＜0.01 或 P＜0.05），并增加小鼠气道酚红排泌量（P＜0.01），表明其具有止咳、祛痰的作用，尤以氯仿提取物作用效果最好（P＜0.01）[29]。
4.6最新研究
王艺红[30]实验结果表明，镰形棘豆总黄酮和总多糖在治疗深Ⅱ度烧伤的创面愈合时间和同期愈合率与阳性对照药（湿润烧伤膏）相当。其中，总黄酮还能够明显减轻烧伤后炎症渗出，缩短渗出时间。
陈晓红[31]实验结果表明，镰形棘豆总黄酮诱导SMMC-7721细胞的凋亡可能是通过线粒体途径，并且与影响CytC及Caspase-3的表达有关。
马玉林[32]实验结果表明，藏药镰形棘豆通过提高缺氧/复氧损伤H9C2心肌细胞活力起到一定的保护作用；镰形棘豆对 H9C2心肌细胞的缺氧/复氧损伤产生一定保护作用，但是作用机制不是通过Caspase-3通路来发挥的，与Caspase-3无关。
古秋丽[33]实验结果表明，与模型组比较，镰形棘豆黄酮苷元各剂量组能明显提高免疫抑制小鼠的淋巴细胞转化能力（P）、NK细胞活性百分率（P）和血清半数溶血值（HC（50）（P）。镰形棘豆黄酮苷元能够提高环磷酰胺造成的免疫抑制小鼠的免疫功能。
程涛[34]实验结果表明，HK-2细胞经TGF-β1诱导后，VEGFmRNA的表达显著上升，与空白对照组比较差异有统计学意义（P），经镰形棘豆总黄酮药物血清干预后，VEGF mRNA的表达逐步下降，与单纯TGF-β1诱导组比较差异有统计学意义（P）。镰形棘豆总黄酮在一定程度上能够抑制TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞纤维化，其机制可能与调节纤维化细胞因子VEGF的mRNA表达有关。
五、藏药镰形棘豆黄酮类化学成分研究意义
近年来，人们对镰形棘豆的化学成分、药理作用和临床应用等方面都做了大量的研究工作，为科学地开发镰形棘豆资源奠定了良好的基础。镰形棘豆黄酮类成分抗炎、抗肿瘤[35]作用最为明显。未来的重点研究方向也是镰形棘豆黄酮类成分提取与分离，及其药理毒理作用，也可为研究新药奠定良好的基础。
图2 棘豆属植物中的黄酮类化合物母核结构
表1 棘豆属植物中的黄酮类
序号 | 化合物名称 | 母核 | 取代基 |
1 | 芹菜素 | A | 5,7, 4′-OH |
2 | 芹菜素-7-O-葡萄糖苷 | A | 5,4′-OH, 7-O-β-D-glc |
3 | 芹菜素-7-O-二葡萄糖苷 | A | 5, 4′-OH, 7-O-β-D-glc (1→ 2)-β-D-glc |
4 | 芹菜素-7-O-木糖葡萄糖苷 | A | 5, 4′-OH, 7-O-β-D-xyl (1→ 2)-β-D-glc |
5 | 芹菜素-7-O-新橙皮糖苷 | A | 5, 4′-OH, 7-O-α-L-rha (1→ 2)-β-D-glc |
6 | 芹菜素-7-O-芸香糖苷 | A | 5, 4′-OH, 7-O-α-L-rha (1→ 6)-β-D-glc |
7 | 芹菜素-7-O-阿拉伯糖葡萄糖苷 | A | 5, 4′-OH, 7-O-α-L-arb (1→ 6)-β-D-glc |
8 | 白杨素 | A | 5, 7-OH |
9 | 3′-甲氧基木犀草素 | A | 5, 7, 4′-OH, 3′-OMe |
10 | 3′-甲氧基木犀草素-7-O-葡萄糖苷 | A | 5, 4′-OH, 3′-OMe, 7-O-β-D-glc |
11 | 3′-甲氧基木犀草素-7-O-二葡萄糖苷 | A | 5,4′-OH,3′-OMe, 7-O-β-D-glc (1→ 2)-β-D-glc |
12 | 3′-甲氧基木犀草素-7-O-芸香糖苷 | A | 5,4′-OH,3′-OMe, 7-O-α-L-rha (1→ 6)-β-D-glc |
13 | 木犀草素 | A | 5, 7, 3′, 4′-OH |
14 | 木犀草素-7-O-葡萄糖苷 | A | 5, 3′, 4′-OH, 7-O-β-D-glc |
15 | 木犀草素-7-O-二葡萄糖苷 | A | 5, 3′, 4′-OH, 7-O-β-D-glc (1→ 6)-β-D-glc |
16 | 木犀草素-7-O-芸香糖苷 | A | 5, 3′, 4′-OH, 7-O-α-L-rha (1→ 6)-β-D-glc |
17 | 木犀草素-3′-O-葡萄糖苷 | A | 5, 7, 4′-OH, 3′-O-β-D-glc |
18 | 山柰酚 | B | 5, 7, 4′-OH |
19 | 紫云英苷 | B | 5, 7, 4′-OH, 3-O-β-D-glc |
20 | 山柰酚-7-O-鼠李糖苷 | B | 5, 4′-OH, 7-O-α-L-rha |
21 | 山柰酚-3-O-二葡萄糖苷 | B | 5, 7, 4′-OH, 3-O-β-D-glc (1→ 2)-β-D-glc |
22 | 山柰酚-3-O-木糖葡萄糖苷 | B | 5, 7, 4′-OH, 3-O-β-D-xyl (1→ 2)-β-D-glc |
23 | 山柰酚-3-O-芸香糖苷 | B | 5, 7, 4′-OH, 3-O-α-L-rha (1→ 6)-β-D-glc |
24 | 山柰酚-7-O-葡萄糖鼠李糖苷 | B | 5, 4′-OH, 7-O-α-L-rha (1→ 2)-β-D-glc |
25 | 山柰酚-3-O-葡萄糖鼠李糖-7-O-鼠李糖苷 | B | 5,4′-OH,7-O-α-L-rha,3-O-α-L-rha(1→2)-β-D-glc |
26 | 山柰酚-3-O-葡萄糖-7-O-葡萄糖苷 | B | 5, 4′-OH, 3, 7-O-β-D-glc |
27 | 刺槐苷 | B | 5,4′-OH,7-O-α-L-rha,3-O-α-L-rha(1→6)-β-D-gal |
28 | 山柰酚-3-O-6″-乙酰吡喃葡萄糖苷 | B | 5, 7, 4′-OH, 3-O-β-D-glc (6″-O-acetyl) |
29 | 山柰酚-3-O-6″-丙二酰吡喃葡萄糖苷 | B | 5, 7, 4′-OH, 3-O-β-D-glc (6″-O-malonyl) |
30 | 槲皮素 | B | 5, 7, 3, 4′-OH |
31 | 槲皮素-3-O-葡萄糖苷 | B | 5, 7, 3′, 4′-OH, 3-O-β-D-glc |
32 | 异槲皮苷 | B | 5, 7, 3′, 4′-OH, 3-O-β-D-glc |
33 | 槲皮素-3-O-二葡萄糖苷 | B | 5, 7, 3′, 4′-OH, 3-O-β-D-glc (1→ 2)-β-D-glc |
34 | 槲皮素-3-O-芸香糖苷 | B | 5, 7, 3′, 4′-OH, 3-O-α-L-rha (1→ 6)-β-D-glc |
35 | 槲皮素-3-O-木糖葡萄糖苷 | B | 5, 7, 3′, 4′-OH, 3-O-β-D-xyl (1→ 2)-β-D-glc |
36 | 槲皮素-3, 7-O-二葡萄糖苷 | B | 5, 3′, 4′-OH, 3, 7-O-β-D-glc |
37 | myriophylloside B | B | 5,3′,4′-OH,7-O-α-L-rha,3-O-β-D-glc(6″-p-coumaroyl)(1→ 2)-xyl |
38 | myriophylloside C | B | 5,3′,4′-OH,7-O-α-L-rha,3-O-β-D-glc(6″-caffeoyl) (1→ 2)-xyl |
39 | myriophylloside D | B | 5,4′-OH,7-O-α-L-rha,3-O-β-D-glc(6″-p-coumaroyl) (1→ 2)-xyl |
40 | myriophylloside E | B | 5,3′,4′-OH,7-O-α-L-rha,3-O-β-D-glc(6″-feruloyl) (1→2)-xyl |
41 | myriophylloside F | B | 5,3′,4′-OH,7-O-α-L-rha,3-O-β-D-glc(6″-p-coumaroyl)(1→ 2)-glc |
42 | 异鼠李素 | B | 5, 7, 4′-OH, 3′-OMe |
43 | oxymyrioside | B | 5, 3′, 4′-OH, 7-O-α-L-rha, 3-O-β-D-glc (1→ 2)-β-D-glc |
44 | acetyloxymyrioside | B | 5,3′,4′-OH,7-O-α-L-rha,3-O-β-D-glc(6″-O-acetyl) (1→ 2)-β-D-glc |
45 | coumaroylisooxymyrioside | B | 5,3′,4′-OH,7-O-α-L-rha,3-O-β-D-glc(6″-O-coumaroyl)(1→ 2)-β-D-glc |
46 | 鼠李素 | B | 5, 3′, 4′-OH, 7-OMe |
47 | 鼠李素-3-O-葡萄糖苷 | B | 5, 3′, 4′-OH, 7-OMe, 3-O-β-D-glc |
48 | 鼠李素-3-O-半乳糖苷 | B | 5, 3′, 4′-OH, 7-OMe, 3-O-β-D-gal |
49 | 异鼠李素-3-O-葡萄糖苷 | B | 5, 7, 4′-OH, 3′-OMe, 3-O-β-D-glc |
50 | 鼠李柠檬素 | B | 5, 4′-OH, 7-OMe |
51 | 鼠李柠檬素-3-O-葡萄糖苷 | B | 5, 4′-OH, 7-OMe, 3-O-β-D-glc |
52 | 鼠李柠檬素-3-O-半乳糖苷 | B | 5, 4′-OH, 7-OMe, 3-O-β-D-glc |
53 | 鼠李柠檬素-3-O-半乳糖苷-4′-O-葡萄糖苷 | B | 5-OH, 7-OMe, 3-O-β-D-gal, 4′-O-β-D-glc |
54 | 鼠李柠檬素-5-甲氧基-7-羟基-3-O-半乳糖-4′-O-葡萄糖苷 | B | 5-OMe, 7-OH, 3-O-β-D-gal, 4′-O-β-D-glc |
55 | 杨梅苷 | B | 5, 7, 3′, 4′, 5′-OH, 3-O-β-D-glc |
56 | 5, 7-二羟基-4′-甲氧基黄酮醇 | B | 5, 7, 3′, 4′, 5′-OH, 3-O-β-D-glc |
57 | 7, 3′-二羟基-2′, 4′-二甲氧基异黄烷 | C | 7, 3′-OH, 2′, 4′-OMe |
58 | 异甘草素 | D | 7, 4′-OH |
59 | 7-羟基-4′-甲氧基二氢黄酮 | E | 7-OH, 4′-OMe |
60 | 2′, 4′-二羟基-4-甲氧基查耳酮 | F | 2′, 4′-OH, 4-OMe |
61 | 2′, 4′-二羟基查耳酮 | F | 2′, 4′-OH |
62 | 2′-羟基-4′-甲氧基查耳酮 | F | 2′-OH, 4′-OMe |
63 | 2′-甲氧基-4′-羟基查耳酮 | F | 2′-OMe, 4′-OH |
64 | 2′, 4′-二羟基二氢查耳酮 | G | 2′, 4′-OH |
参考文献
[1]Chen WH, Wang R, Shi YP.Flavonoids in the poisonous plant Oxytropis falcata[J].J Nat Prod, 2010, 73(8): 1398-1403
[2]朱云相.中国豆科植物分类系统概览: 英文[J]. 植物研究, 2004, 24(1): 20-27
[3]蒂玛尔丹增彭措. 晶珠本草[M]. 上海: 上海科学技术出版社,1986: 181
[4]Zhang XJ, Li LY, Norbo KS, et al.Flavonoids from Tibetan medicine Oxytropis falcataBunge[J].Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences,2014,23(2): 99-105
[5]Zhang XJ, Li LY, Wang SS, et al. Oxyfadichalcones A-C：three chalcone dimers fused through a cyclobutane ring from Tibetan medicine Oxytropis falcata Bunge[J]. Tetrahedron, 2013, 6 (52): 110, 74
[6]郑尚珍, 确生, 许先芳, 等.GC-MS联用法测定镰形棘豆石油醚浸提物的化学成分[J]. 西北师范大学学报(自然科学版), 2003, 39 (2): 51-53
[7]王栋, 杨欢, 童丽,等.藏药镰形棘豆的镇痛抗炎活性[J].药学与临床研究, 2008, 16(2) 90-93
[8]杨光明, 张芳芳, 王栋,等.镰形棘豆对SMMC-7721肝癌细胞增殖及MMP-2表达的影响[J].中国中药杂志, 2011, 36(9): 1227-1230
[9]中国科学院《中国植物志》编委会. 中国植物志[M]. 北京:科学出版社, 1998: 140
[10]李玉林, 廖志新, 孙洪发,等.急弯棘豆化学成分的研究[J].中草药,1998, 29(3):149-151
[11]梁斌, 颜世芬, 陈茂奇,等.甘肃棘豆挥发成分研究Ⅰ.精油成分分离与鉴定[J].分析测试学报, 1994, 13(1): 37-43
[12]付聘宇, 白红进, 张波,等.宽苞棘豆的化学成分及其生物活性研究初报[J].西北农林科技大学学报(自然科学版), 2004, 32 (9): 97-100
[13]高博,李钦,杨丽霞, 等. 镰形棘豆的研究现状与分析[J]. 中医研究, 2017, 30 (1): 75-80
[14]徐超,刘斌,石任兵, 等.棘豆属植物化学成分与药理作用[J].国外医药植物学分册, 2008, 23(1):1-7
[15]杨欢,王栋,蔡宝昌, 等. 镰形棘豆的化学成分研究[J]. 中国药学杂志, 2008, 43(5):338-340
[16]]曾棋平,王艺红,蔡小辉, 等. 星点设计-效应面法优化镰形棘豆总黄酮的提取工艺[J]. 中国药师, 2017, 20 (5): 801-804
[17]杨欢,王栋,童丽, 等. 镰形棘豆的化学成分研究[J]. 南京中医药大学学报, 2008, 24(1):43-44
[18]确生,张岩松,赵玉英, 等. 藏药镰形棘豆的化学成分研究[J]. 中草药, 2007, 38(10):1458-1460
[19]杨欢, 王栋, 童丽,等.镰形棘豆的化学成分研究(I)[J].中国药学杂志, 2008, 43 (5):338-340
[20]Chen ZP, Qu MM, Chen HX, et al. The studies of anti-inflammatory and analgesic activities and pharmacokinetics of Oxytropis falcate Bunge extraction after transdermal administration in rats[J]. Fitoterapia, 2011, 82(3): 426-433
[21]杨丽霞,范强,姜良恩, 等. 镰形棘豆总黄酮对3T3-Ll脂肪细胞胰岛素抵抗模型炎症因子的作用[J]. 中医研究, 2017, 30 (1): 66-70
[22]Yang GM, Wang D, Tang Wm et al. Anti-inflammatory and antioxidant activities of oxytropis falcata fractions and its possible anti-inflammatory mechanism[J]. Chinese Journal of Natural Medicines, 2010, 8(4): 285-292
[23]楼成华,王明艳,蔡宝昌, 等.镰形棘豆黄酮类化合物抗肿瘤活性的体外实验研究[J].南京中医药大学学报, 2009, 25(1): 46-50
[24]李萌, 程海清, 杨光明,等.藏药镰形棘豆醇提物酸碱分离及抗小鼠Lewis肺癌活性初步筛选[J].中药新药与临床药理,2017,28(5):623-627
[25]Wang D, Tang W, Yang GM, et al. Anti-inflammatory,antioxidant and cytotoxic activities of flavonoids from Oxytropis falcata Bunge[J]. Chinese Journal of Natural Medicines, 2010, 8(6):461-465
[26]李茂星,尉丽力,邱建国, 等.镰形棘豆黄酮类成分提取工艺与体外抗氧化活性[J].中药材, 2012, 31(9):88-92
[27]李茂星,兰芝荟,何希瑞, 等. 镰形棘豆总黄酮防紫外线伤作用研究[J]. 中药材, 2011, 34(3):93-97
[28]姜华,胡君茹,程晓华, 等. 藏药镰形棘豆总黄酮苷元抑菌活性的研究[J]. 天然产物研究与开发, 2014, 26 (3): 407-409, 383
[29]陈锦珊,杨钦磊,刘晓玲, 等. 藏药镰形棘豆的化学成分、药理作用及毒理学研究进展[J].中国药房, 2016, 27 (28): 3945-3948
[30]王艺红,蔡小辉,曾棋平, 等. 藏药镰形棘豆抗深Ⅱ度烧伤活性部位筛选[J]. 解放军药学学报, 2018 (1): 11-14
[31]陈晓红,程海清,邓易, 等. 镰形棘豆对SMMC-7721细胞线粒体膜电位和凋亡相关蛋白表达的影响[J]. 南京中医药大学学报, 2017, 33 (1): 54-58
[32]马玉林,文进才让,芦殿香, 等. 藏药镰形棘豆对缺氧/复氧H9C2心肌细胞损伤的保护作用[J]. 基因组学与应用生物学, 2017, 36 (3): 1180-1183
[33]古秋莉,田卫花,姜华, 等. 镰形棘豆黄酮苷元对免疫抑制小鼠免疫功能的影响[J]. 西部中医药, 2017, 30 (5): 4-6
[34]程涛,杨丽霞,李钦, 等. 镰形棘豆总黄酮含药血清对TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞VEGF mRNA表达的影响[J]. 西部中医药, 2017, 30 (1): 4-6
[35]陈醒,杨光明,何媛媛, 等. 镰形棘豆总生物碱对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用研[J]. 中华中医药杂志, 2011, 26(11):2540-2542
3. 设计方案和技术路线
研究方案：
首先，了解本论题的研究状况，形成文献综述和开题报告。
其次，进一步收集阅读资料并研读文献，做好相关的记录，形成论文提纲。第三，深入研究，开展实验，写成初稿。
4. 工作计划
2022.01-2022.02 进行文献检索，确定实验方案
2022.03-2022.04 对镰形棘豆进行提取与分离
2022.05-2022.06 数据分析，论文整理
5. 难点与创新点
本实验主要是将镰形棘豆进行提取分离，提取阶段主要是利用碱提酸沉法对黄酮类化合物进行初步提取，有利于后续对于成分的富集和分离。成分分离主要采用硅胶柱色谱和聚酰胺柱色谱联用，镰形棘豆中成分较多，主要是黄酮类化合物，而黄酮类化合物利用聚酰胺色谱分离效果最佳，同时利用硅胶柱色谱，对石油醚层中的黄酮类化合物进行分离，以期得到多种黄酮类化合物。
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