1. 研究目的与意义
一.毕业设计内容
药理研究表明,苦地丁有清热解毒、活血消肿之效,治疗感冒发热、咳嗽、肝炎等多种炎症,尤其对风湿病、心肌炎有较好疗效,是具有广泛应用价值的植物药。细胞因子是一组调节细胞反应的蛋白质包括一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子(TNF-α)以及白介素(IL),由体内多种细胞如巨噬细胞、平滑肌细胞、内皮细胞等产生分泌。重感染情况下,细胞因子分泌过多将导致过度炎症反应。NF-κB是一种普通存在的,具有多向转录调节作用的核转录因子,是LPS所介导的信号转导通路中最重要的下游通路。IκBα是 NF-κB 的内源性抑制因子。当LPS刺激巨噬细胞后,NF-κB(p65)和IκBα将被磷酸化,从而激活细胞内炎症信号通路NF-κB,导致细胞核内相关炎症因子和介质的基因表达发生变化,刺激合成和释放众多内源性生物活性因子,包括NO、TNF-α、IL-1β和IL-6,产生炎症反应。
本论文将脂多糖(LPS)作用于RAW264.7小鼠巨噬细胞,MTT法检测不同浓度苦地丁醇提物对细胞活力的影响从而确定苦地丁醇提物浓度。然后用Griess试剂法测定苦地丁醇提物对巨噬细胞产生NO的影响,在此基础上分别用ELISA试剂盒和实时定量荧光PCR技术测定苦地丁对LPS刺激的RAW264.7细胞产生的TNF-α、IL-1β和IL-6水平及其蛋白表达以及iNOS蛋白表达,从炎症抑制方面阐述苦地丁的抗炎作用。最后采用westernblot技术检测苦地丁醇提物对LPS诱导的RAW264.7细胞的NF-κB(p65)和IκBα信号通路的影响,为苦地丁醇提物的抗炎机制提供更深入的了解。通过以上实验来探讨苦地丁醇提物的抗炎作用及其对炎症信号转导通路的调控。
2. 文献综述
苦地丁乙醇提取物的抗炎作用及其机制研究
摘 要:随着社会的不断进步,科学的不断发展,人们对疾病的不断认识以及健康观念的更新,国内外对中蒙药及天然药物的研究已愈来愈寄予关注。蒙药是蒙古民族传统的药,在防治一系列重大疾病中显示出独特的效能。具有完整而明确的理论指导,天然绿色,毒副作用小,用药安全,临床疗效显著。蒙药苦地丁,蒙古族药名为地各达,系罂粟科(Papaveraceae)植物紫堇(Corydalis bungeana Turcz)的干燥全草。辛、苦、寒。清热解毒,锁脉,杀菌消肿,调血。用于流行感冒,热性瘟疫,血热头痛,伤热,肠热,肝胆热,牙痛,急慢性肝炎,痢疾,脓肿等病。近几年,国内外学者对蒙药苦地丁做了大量研究,本文主要对其化学成分、抗炎作用及机制作一综述。
3. 设计方案和技术路线
一.研究方案
本论文将脂多糖(LPS)作用于RAW264.7小鼠巨噬细胞,MTT法检测不同浓度苦地丁醇提物对细胞活力的影响从而确定苦地丁醇提物浓度。然后用Griess试剂法测定苦地丁醇提物对巨噬细胞产生NO的影响,在此基础上分别用ELISA试剂盒和实时定量荧光PCR技术测定苦地丁对LPS刺激的RAW264.7细胞产生的iNOS、TNF-α、IL-1β和IL-6水平及其蛋白表达,从炎症抑制方面阐述苦地丁的抗炎作用。最后采用westernblot技术检测苦地丁醇提物对LPS诱导的RAW264.7细胞的NF-κB(p65)和IκBα信号通路的影响,为苦地丁醇提物的抗炎机制提供更深入的了解。通过以上实验来探讨苦地丁醇提物的抗炎作用及其对炎症信号转导通路的调控。
一.技术路线
4. 工作计划
第一阶段:2022.1-2文献综述,思路形成,实验方案制定;
第二阶段:2022. 3初步试验、实验条件选择;
第三阶段:2022.4-5进行实验研究;
5. 难点与创新点
随着社会的不断进步,科学的不断发展,人们对疾病的不断认识以及健康观念的更新,国内外对中蒙药及天然药物的研究已愈来愈寄予关注。
蒙药是蒙古民族传统的药,在防治一系列重大疾病中显示出独特的效能。
具有完整而明确的理论指导,天然绿色,毒副作用小,用药安全,临床疗效显著。
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