1. 研究目的与意义
赤芍,始见于《神农本草经》,其中描述为芍药,味苦平。主写起腹痛,除血痹、破坚积寒热疝瘕、止痛生川谷。
《中华人民共和国药典》2015年版一部规定,赤芍为毛茛科植物芍药Paeonia lactiflora Pall.或川赤芍Paeonia veitchii Lynch的干燥根,性味:苦,微寒,归肝经。研究表明,赤芍中所含化学成分较多,主要成分是单萜类、三萜类、挥发油、鞣质类和儿茶素等其他成分。同时,现代实验表明,赤芍具有抗肿瘤、保肝、抗血小板凝聚、抗动脉粥样硬化、降血糖、抗病毒作用。
赤芍功效为:清热凉血,散瘀止痛。主要用于热入营血,温毒发斑,吐血咯血,目赤肿痛,肝郁肋痛,经闭痛经,跌扑损伤,痈肿疮毒。赤芍的炮制品分为:酒赤芍和炒赤芍。炒赤芍,药性偏于缓和,活血止痛而不伤中,多用于瘀滞肿痛。酒赤芍,加入黄酒之后,活血散瘀力强,清热凉血力弱。多用于闭经痛经,跌打损伤。
2. 文献综述
综述
摘要 目的 查阅近些年来关于赤芍的研究状况和进展,对赤芍的有效成分,主要功能等方面进行详细的了解。了解中药指纹图谱的建立和意义 方法 查找并翻阅近年来关于赤芍的文献资料,对于赤芍的化学成分、药理作用等方面进行归纳和总结。查看指纹图谱的最新研究进展,建立专属赤芍药材的指纹图谱结果与结论 赤芍是一味清热凉血,活血化瘀的中药,具有一定的药理活性及作用。用HPLC可以建立出赤芍这味药材的指纹图谱。
3. 设计方案和技术路线
研究方案
赤芍药材特征图谱
1.1 文献检索
通过查阅大量文献,参考其实验条件及实验结果,进行筛选和设计,做出修改,进行优化设计。
1.2 实验条件摸索
通过前步的查阅资料,设计出一套方案.(可以先利用已有的文献的做出的图谱比较好的条件,先进行预实验,再根据实验结果进行修改。)
1.2.1 流动相的选择
选取几种常用的流动相进行比较:乙腈-磷酸或者乙腈-水,具体情况根据实验结果进行调整。
1.2.2 梯度的优化
选取分离效果较好的流动相系统,更改梯度,根据结果,进行调整,优化,直至分离效果较佳。
1.2.3 波长的选择
采集3D全扫描图谱,选择分离效果较好的波长作为测定波长。
1.2.4 色谱柱的选择
选择不同的色谱柱,在相同条件之下比较其分离效果。
1.2.5柱温的选择
通过比较25℃、30℃、35℃时的峰形和分离效果,选择合适的柱温。
1.2.6 流速的选择
暂定为0.8ml/min、1.0ml/min和1.2ml/min,看是否有较大影响。
1.3 药材的处理
1.3.1 提取溶剂
选择甲醇、乙醇、水等提取溶剂及其不同浓度,比较其分离效果。
1.3.2 提取方式
暂定考察的提取方式为回流、超声、振摇、索氏提取四种提取方式
1.3.3 提取时间
提取时间暂定为30min、1h、1h30min
1.4 对照品溶液及供试品溶液的制备
1.5 方法学考察
1.5.1精密度考察
取同一药材粉末,制成供试品,连续进样6次,相对保留时间RSD
1.5.2重复性考察
取同一批药材粉末6份,制成供试品,要求相对保留时间RSD
1.5.3稳定性考察
取同一供试品溶液,室温放置,分别于 0,2,4,6,8,10,12,14,16,24 h 测定,要求相对保留时间RSD
1.6 进行测定
选取十批以上赤芍药材,取最优条件进行测定。
1.7相对保留时间和峰面积的测定
1.8 共有峰的建立和相似度的计算
1.9 赤芍药材的特征图谱
样品采集 |
预处理(提取分离) |
供试品 |
色谱图 |
特征峰 |
特征图谱 |
质量稳定性评价 |
指认 |
检测器、检测波长等条件的选择 |
计算机图谱分析与处理 |
相似度评价 |
4. 工作计划
3.4-3.7 查阅文献资料
3.8-3.17完成开题报告
3.17-5.20完成实验
5. 难点与创新点
建立赤芍配方颗粒生产用赤芍药材的特征图谱,使更多的色谱峰得到分离,明确其化学结构,结合其药理作用,确定特征峰,从而更全面的控制其质量。
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